Савремене методе дијагностиковања ХИВ инфекције

Правовремена дијагноза ХИВ инфекције постаје изузетно важна мјера, будући да ранији почетак лијечења може у великој мјери одредити даљи развој болести и продужити живот пацијента АИДС. Последњих година је уочен значајан напредак у идентификацији ове страшне болести: стари тестни системи се замењују напреднијим, методе испитивања постају све приступачније, а њихова тачност је значајно повећана.

У овом чланку ћемо говорити о савременим методама дијагностиковања ХИВ инфекције, знајући које су корисне за правовремено лијечење овог проблема и одржавање нормалног квалитета живота болесника.


Методе дијагностиковања ХИВ-а

У Русији се спроводи стандардна процедура за дијагнозу ХИВ инфекције, која обухвата два нивоа:

  • ЕЛИСА тест систем (сцреенинг аналисис);
  • имунолошки блотинг (ИБ).

За дијагностику се могу користити и друге методе:

  • ПЦР;
  • брзи тестови.

ЕЛИСА тестни системи

У првој фази дијагнозе користи се скрининг тест (ЕЛИСА) за откривање ХИВ инфекције, који се заснива налабораторијски створени протеини ХИВ-а који хватају специфична антитела која се производе у организму као одговор на инфекцију. Након интеракције са реагенсима (ензимима) тестног система, боја индикатора се мења. Даље, ове промене боје се обрађују на посебној опреми, која одређује резултат извршене анализе.

Овакви ЕЛИСА тестови могу да покажу резултат у року од неколико недеља након увођења ХИВ инфекције. Ова анализа не одређује присуство вируса, али открива производњу антитела на њега. Понекад, у људском телу, производња антитела на ХИВ почиње после 2 недеље на пољу инфекције, али за већину људи се производи касније, после 3-6 недеља.

Постоје четири генерације ЕЛИСА тестова са различитом осетљивошћу. Последњих година чешће се користе тестни системи треће и четврте генерације, који се стварају на бази синтетских пептида или рекомбинантних протеина и имају већу специфичност и прецизност. Могу се користити за дијагностицирање ХИВ инфекције, праћење преваленције ХИВ-а и осигурање сигурности код тестирања крви донора. Тачност ЕЛИСА тест система ИИИ и ИВ генерације је 93-99% (тестови који се производе у земљама Западне Европе су осјетљивији - 99%).

За извођење ЕЛИСА теста, 5 мл крви се прикупља из вене пацијента. Између задњег оброка и анализе треба узети најмање 8 сати (у правилу се ради ујутро на празан желудац). Такав тест се препоручује да прође најраније 3 недеље послесумња на инфекцију (на пример, након незаштићеног односа са новим сексуалним партнером).

Резултати ЕЛИСА теста се добију за 2-10 дни:

  • негативни резултат: указује на одсуство ХИВ инфекције и не захтева контактирање специјалисте;
  • лажно негативан резултат: може се уочити у раним фазама инфекције (до 3 седмице), у каснијим фазама АИДС-а, са израженом супресијом имуног система иу случају неправилне припреме крви
  • лажно позитиван резултат: може се уочити код неких болести иу случају неправилно извршене припреме крви;
  • позитиван резултат: указује на инфекцију ХИВ-ом, захтијева спровођење информационе сигурности и упућивање пацијента специјалисту у центру за АИДС.

Засо ЕЛИСА тест може да даје лажно позитивне резултате?

Лажно позитивни резултати ЕЛИСА теста на ХИВ могу се посматрати са неправилним третманом крви или код пацијената са таквим стањима и болестима:

  • мултипли мијелом;
  • алкохолни хепатитис ;
  • заразне болести изазване Епстеин-Барр вирусом;
  • стање после дијализе ;
  • аутоимуне болести;
  • у односу на позадину трудноће;
  • стање након вакцинације.

Из горе описаних разлога, у крви могу бити присутна неспецифична унакрсно реагујућа антитела, чија је производња изазвана не-ХИВ инфекцијом.

Последњих година учесталост лажно позитивних резултатазначајно је смањен због употребе тест система ИИИ и ИВ генерације, који садрже више осетљиви пептид и рекомбинантне протеине (синтетизују се коришћењем генетичког инжењеринга ин витро). Након почетка употребе ЕЛИСА тестова, учесталост лажно позитивних резултата значајно се смањила и износи око 0,02-0,5%.

Откривање лажно позитивног резултата не значи да је особа заражена ХИВ-ом. У таквим случајевима, СЗО препоручује други ЕЛИСА тест (обавезна ИВ генерација).

Крв пацијента се шаље у референтну или арбитражну лабораторију са ознаком "поновити" и тестира се на ЕЛИСА тест систему четврте генерације. Ако је резултат нове анализе негативан, онда се први резултат препознаје као погрешан (лажно позитиван) и не изводи се ИБ. Ако се током другог теста добије позитиван или сумњив резултат, пацијенту се мора дати ИБ након 4-6 недеља да би се потврдила или одбила ХИВ инфекција.

Имуно блот

Коначна дијагноза ХИВ инфекције може се установити тек након добијања позитивног резултата имунолошког упијања (ИБ). На њу се наноси нитроцелулозна трака на коју се примјењују вирусни протеини.

Узимање узорака крви за ИБ врши се из вене. Затим се подвргава посебној обради и протеини садржани у њеном серуму се одвајају у посебном гелу према њиховом набоју и молекуларној тежини (манипулација се врши на посебној опреми под утицајем електричних уређаја).поља). На гел из крвног серума наметнути нитроцелулозну траку и извршити упијање ("блоттинг") у посебној комори. Трака се обрађује и ако се користе материјали имају антитела на ХИВ, они су повезани са антигенским тракама на ИБ и појављују се као линије.

ИС се сматра позитивним ако:

  • према америчким критеријумима ЦДЦ - постоје две или три линије гп41, п24, гп120 /гп160 на траци;
  • по критеријуму америчке ФДА - на траци постоје две линије п24, п31 и линија гп41 или гп120 /гп160.
  • У 99,9% случајева, позитиван резултат ИБ указује на ХИВ инфекцију.

    У одсуству линија - ИБ је негативна.

    У идентификацији линија са гп160, гп120 и гп41-ИБ је сумњиво. Овај резултат се може открити када:

    • почетне фазе ХИВ инфекције ;
    • туберкулоза ;
    • онколошке болести;
    • трудноћа;
    • честе трансфузије крви.

    У таквим случајевима, препоруча се да се изврши додатно испитивање користећи сет друге компаније. Ако након додатног ИБ резултат остаје упитан, онда је потребно посматрање у року од шест мјесеци (ИБ се изводе свака 3 мјесеца).

    Реакција ланчане полимеразе

    ПЦР тест може одредити вирусну РНК. Његова осетљивост је довољно висока и омогућава детекцију ХИВ инфекције у року од 10 дана након инфекције. У неким случајевима, ПЦР може дати лажно позитивне резултате, јер његова висока осетљивост може реаговати и на антитела на друге инфекције.

    Ова дијагностичка техника је скупа, захтева посебну опрему и високо квалификоване стручњаке. Ови разлози не дозвољавају да се спроведу у масовном тестирању становништва.

    ПЦР се упорабља у таквим случајевима:

    • откривање ХИВ-а код новорођенчади рођене од ХИВ-инфицираних мајки;
    • откривање ХИВ-а у "прозору" или када је упитна сигурност информација;
    • да контролише концентрацију ХИВ-а у крви;
    • за проучавање донорске крви.

    Само ПЦР тестом, ХИВ се не дијагностикује, већ се проводи као додатна дијагностичка метода за рјешавање спорних ситуација.


    Експресне методе

    Једна од иновација у дијагнози ХИВ-а постала је брзи тестови, чији се резултати могу процијенити за 10-15 минута. Најефикаснији и најпрецизнији резултати се добијају имунохроматографским тестовима заснованим на принципу капиларног протока. То су специјалне траке на које се наноси крв или друге проучене течности (пљувачка, урин). У присуству антитела на ХИВ, након 10-15 минута, на тесту се појави боја и контролна трака - позитиван резултат. Ако је резултат негативан, појављује се само контролна трака.

    Као и након ЕЛИСА тестова, резултате брзих тестова треба потврдити ИБ анализом. Тек тада се може направити дијагноза ХИВ инфекције.

    Постоје експресни комплети за кућно тестирање. ОраСуре Тецхнологиес1 (УСА) тест одобрен од стране ФДА, продатбез рецепта и могу се користити за откривање ХИВ-а. Након теста, у случају позитивног резултата, пацијенту се препоручује преглед у специјализованом центру како би се потврдила дијагноза.

    Преостали тестови за кућну употребу још нису одобрени од стране ФДА и њихови резултати могу бити врло сумњиви.

    Упркос чињеници да су брзи тестови инфериорни у својој тачности на ЕЛИСА тестове четврте генерације, они се широко користе за додатно тестирање популације.

    Могуће је полагати тестове за откривање ХИВ инфекције у било којој клиници, централној и регионалној болници или у специјализованим центрима за АИДС. На територији Русије, они се изводе апсолутно поверљиво или анонимно. Сваки пацијент може очекивати медицинско или психолошко савјетовање прије или након анализе. За тестирање на ХИВ морате платити само у комерцијалним болницама, док се у јавним клиникама и болницама обављају бесплатно.

    За информације о томе на које начине се можете заразити ХИВ-ом и који митови постоје о могућностима заразе, прочитајте овај чланак.

    Којим лекаром да се консултира

    Да бисте били тестирани на ХИВ, морате посјетити терапеута и упутити га на анализу. Поред тога, можете доћи директно до Центра за превенцију и контролу АИДС-а и тамо бити анонимно тестирани. Упућује га специјалиста за инфективне болести или венеролог ако постоји сумња на ХИВ инфекцију.